多重PCR快速检测技术在食品致病微生物检测中的应用
摘 要：目前来说食品行业发展势头迅猛，食品行业的卫生状况没有得到很好的控制。导致很多有害的微生物和细菌，在严重危害着食品的品质和人们的身体健康。所以监管人员需要采取更先进更专业的微生物检测技术，快速准确地检测食品中致病微生物的含量，本文介绍现代食品检测技术和多重PCR技术的技术原理，同时介绍多重PCR技术运用在食品致病微生物检测的具体应用形式，以供同行参考研究。
关键词：多重PRC快速检测技术；食品致病微生物检测；技术原理；检测方式
中图分类号：TS207.4 文献标识码：A 文章编号：1004-7344（2018）26-0375-02
1 引 言
食品致病微生物的种类数量在逐年增长，对于微生物的检测方法也在不断增多，同时得到一定的创新和改善。在实际的食品致病微生物检测当中，采用传统的常规培养法、免疫学方法等都存在着操作复杂、菌落培养时间长等种种问题。而采用多重PCR技术，其具有快速、简便等多个优点，和传统的检测手段相比克服了操作繁琐、时间长的缺点，同时相关检测结果也表明，采用多重PRC技术效果显著、准确率高，所以目前正在致病菌检测、转基因产品等方面的研究中被广泛运用。
2 现代食品检测技术和多重PCR快速检测技术浅析
2.1 现代食品检测技术
食品指的是不经过加工、或经过一定加工后，具有营养价值可供人们食用的物质。食品当中致病细菌含量的多少直接影响到了人们的身体健康，所以食品一定要经过严格的现代食品检测技术检验。
运用生物、物理或化学等学科技术对食品工业当中生产的食物成品、半成品、原料等物质进行微生物的分析检测，是食品检测的首要任务。现代食品检测技术根据被检测样本种类的不同，由微生物分析法、仪器分析法、感官检验法等多种检测方式。随着时代的进步和科学技术水平的提升，国际上在现代食品检测技术方面的研究成果日新月异，先进的检测技术在不断用于实践当中，新技术的产生使得食品行业可以运用更高精尖的食品检测仪器来进行食品安全的检测，不仅缩短检测时间、降低检测成本，还能提升检测准确率，可谓一举多得。目前主要有电子传感检测技术、生物传感检测技术、PCR基因扩增检测技术等，本文就将针对多重PCR快速检测技术展开分析和探讨。
2.2 多重PCR快速检测技术原理探究
在多重PCR快速检测技术的实际运用当中，PCR技术主要依靠的是聚合酶的链式反应，采用主要模板为RNA，此外还需要使用的辅助工具是DNA聚合酶，以此来实现DNA片段的扩增。针对多重PCR技术来说，主要包括变性、退火和延伸三个步骤，是按从DNA单链转化成DNA双链的过程。我们把这个DNA双链叫做模板，进行多次相同的操作之后，就可以实现循环扩增。多重PCR检测技术是在传统PCR检测技术的基础上，把引物的数量从两对增加到多对，这样可以实现多个序列同时扩增，提升扩增的速度和效率。
2.3 多重PCR快速检测技术优势
多重PCR快速检测技术十分高效，在同一PCR反应管当中可以一次性检测出多种病原微生物，甚至对病原微生物的具体型号进行分型，不仅检测速度非常快，而且可以通过微量的样本就得到准确的数据。对于成组病原体的检测，比如战伤感染厌氧细菌、肠道致病细菌、无芽孢厌氧细菌等多种细菌进行同时检验，既经济又简便。多种病原体在同一个样本中被检测出来，可以节省检测的开支和时间耗费，为临床提供更多有价值的信息。
3 多重PCR快速检测技术用于检测食品致病微生物方法
我国食源性病原菌的种类和数目十分多，其中以肠道致病细菌为主要病原，引起中毒的食物主要是动物性食品。根据目前我国的食品安全管理条例看来，针对食品病原菌的检测通常包括：大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌等，下面本人对常见的、危害性比较大的同时列在国家法律规定检测清单中的有害菌进行描述，同时介绍多重PCR快速检测技术在这些菌落检测上的具体应用方式和应用特点：
3.1 肠出血性大肠菌群
大肠菌群是一群好氧和兼性厌氧的细菌，在人体正常的体温下，24h内能够发酵乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌，大肠菌群的主要来源是人畜的排泄物，除了大肠埃希氏杆菌之外，还有肠桿菌科的肠杆菌属等。我国食品卫生检验检疫标准中提出要对大肠菌群的含量进行检测，该菌群的检出情况代表了食品中是否存在粪便污染。大肠菌群数量的高低代表食物受到粪便污染的程度和对人体健康威胁程度的大小。
对于大肠杆菌来说，它会产生毒素，这种毒素很难通过现有的检测技术进行针对性的检测，但是通过多重PCR快速检测技术则可以在溶血素基因等基因为目的基因的基础之上，准确发现食品中是否含有大肠杆菌。目前对于进口牛肉的质量检疫当中采用多重PCR快速检测技术，以此严格保障进口牛肉的质量合格。总而言之对于大肠菌群的检测，采用PCR检测技术和传统的血清检测相比，准确度提升了不少。
3.2 沙门氏菌
沙门氏菌同属肠杆菌科，是革兰氏阴性肠道杆菌。目前已经发现的沙门氏菌种类达到1000余种根据国家要求，因为沙门氏菌毒性较强，对人体的危害程度较大，所以比较容易遭受沙门氏菌感染的食品比如生鸡蛋等，都需要进行严格的分类管理，进行严格标准的微生物致病菌检测，让这些常见的食物远离沙门氏菌的侵扰，从而有效预防相关疾病对于沙门氏菌的检测，由于食物中沙门氏菌的含量很低，在生产加工的过程中又由于各种因素的干扰让该病原菌的检测准确率进一步降低。而通过多重PCR快速检测技术，可以有效明确沙门氏菌的血清类型，甚至还可以掌握实际的突变情况。目前常用血清型特异性引物rfb基因来专门针对沙门氏菌的致病菌检测，根据检测的实际数据表明，这不但可以运用在常规的血清检测当中，还可以在别的肉品检测当中运用。
3.3 金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌属于葡萄球菌属，是人类重要的一种病原菌，如果摄入量过多可以引发严重的微生物感染，甚至导致人类的死亡。这种细菌在自然界的分布十分广泛，所以其危害食品安全性的可能性也很大。其可以通过食品加工者、销售员等，间接引发食物的微生物感染，造成食物污染。
针对金黄色葡萄球菌来说，在蔬菜和腌制肉食当中都能够大量存在并快速繁殖，最终形成大量的肠毒素导致人类中毒。对于金黄色葡萄球菌的微生物检测技术早已有之，检测方法比如动物实验、血清学实验、免疫荧光蛋白实验和酶联免疫吸附方法等，目前已经相当成熟，相关学者在采用了多重PCR快速检测技术对金黄色葡萄球菌进行微生物检测后发现，准确率和传统方法比没有明显差异，二效率却可以得到提升。
4 结 语
总而言之，多重PCR快速检测技术在食品的微生物检测中应用优势和传统检测技术相比十分大，不仅可以提升检测的准确度和效率，还能够降低检测的操作复杂程度，最终还可以扩增多方面基因的效果，为促进食品致病微生物的检测提供十分重要的依据，由此作为基础保障了食品安全的健康和质量，保障广大人民群众的身体健康，值得大范围推广和应用。
参考文献
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收稿日期：2018-8-3